Назначение
Фотометр-флуориметр микропланшетный ФФМ-01 предназначен для измерения флуоресценции и оптической плотности проб, находящихся в лунках микропланшета.
Применяется для иммунологических, биохимических и микробиологических исследований, в том числе для иммуноферментного и иммунофлуоресцентного анализа, а также для анализа продуктов полимеразной цепной реакции (ПЦР) с помощью флуоресцентных зондов.
Описание
Принцип действия фотометра-флуориметра микропланшетного ФФМ-01
В осветительном канале прибора формируется параллельный пучок, из которого одним из интерференционных светофильтров выделяется узкий спектральный интервал (~30 нм при измерении флуоресценции и ~10 нм при измерении оптической плотности). Прибор работает по двухлучевой оптической схеме - в каждом из режимов (флуоресценции или оптической плотности) часть излучения источника отводится в опорный канал, который используется для учета колебаний мощности источника света. В качестве фотоприемника в опорном канале используется фотодиодный модуль.
Перед началом измерений исследуемые пробы помещаются в лунки микропланшета, после чего микропланшет вдвигается внутрь прибора. В процессе сканирования микропланшет перемещается таким образом, что его лунки последовательно оказываются в фокальной области светового пучка, сформированного осветительной системой.
Режим измерения флуоресценции
В зависимости от выбранного красителя в каналах возбуждения и наблюдения флуоресценции автоматически устанавливаются соответствующие интерференционные фильтры.
Используется конфокальная оптическая схема - одна и та же линза осуществляет как фокусировку возбуждающего излучения на лунке, так и сбор излучения флуоресценции. Собранное излучение флуоресценции фокусируется на диафрагму, а затем попадает на фотокатод фотоэлектронного умножителя (ФЭУ).
За результат измерения флуоресценции F (в относительных единицах) принимается отношение:
F UФЭУ /Uопори (1)
где Uфзу- сигнал фотоумножителя, UonopH, - сигнал опорного канала.
Режим измерения оптической плотности
Излучение, прошедшее через лунку, попадает на фотоприемник (фотодиодный модуль), расположенный под прозрачным планшетом. В планшете несколько лунок должны быть заполнены фоновым раствором. За результат измерения оптической плотности /-ой ячейки принимается отношение:
Di=lg(Ui/U0) (2)
где U; - сигнал фотоприемника, измеренный при прохождении излучения через ячейку с анализируемой пробой, Uo - сигнал при прохождении излучения через ячейку с фоновым раствором.
Технические характеристики
В режиме измерения флуоресценции:
Рабочие длины волн:
- в канале возбуждения, нм
485
538
- в канале регистрации, нм ПРИМЕЧАНИЕ
По дополнительному заказу для каналов возбуждения и регистрации флуоресценции могут поставляться интерференционные фильтры на другие длины волн в диапазоне 350 -700 нм.
Предел обнаружения по флуоресцеину, пмоль
Время анализа планшета с 96 лунками, с, не более
Динамический диапазон
Предел допускаемого относительного СКО случайной составляющей погрешности при концентрации флуоресцеина
1 пмоль/100 мкл, %, не более
В режиме измерения оптической плотности:
Рабочие длины волн, нм 405,450,492,620
(по дополнительному заказу - 340 нм, 414 нм, 540 нм, 690 нм)
Диапазон измеряемых значений оптической плотности, Б
В диапазоне от 0 до 0,5 Б
Предел допускаемого СКО случайной составляющей
погрешности измерения оптической плотности, Б
Предел допускаемой систематической составляющей
погрешности измерения оптической плотности, Б
В диапазоне от 0,5 до 3 Б
Предел допускаемого относительного СКО случайной
составляющей погрешности измерения оптической плотности, %
Предел допускаемой относительной систематической составляющей погрешности измерения оптической плотности, %
Электропитание напряжением, В 220±22
При частоте, Гц
Потребляемая мощность, ВА, не более
Габаритные размеры, мм, не более 465x365x350
Масса, кг, не более
Средняя наработка на отказ, ч
Рабочий диапазон температур, °C
Знак утверждения типа
Наносится на табличку, расположенную на задней панели фотометра-флуориметра, методом шелкографии или фотохимическим методом и на титульном листе руководства по эксплуатации методом печати.
Комплектность
| Наименование | Обозначение | Количество |
| Фотометр-флуориметр микропланшетный ФФМ-01 | ГКНЖ 50.00 000 | 1 |
| Комплект дополнительных интерференционных светофильтров *) | ГКНЖ 50.01.000 | 1 |
| Комплект запасных частей | ГКНЖ.50.02.000 | 1 |
| Транспортная тара | ГКНЖ.50.14.000 | 1 |
| IBM совместимый компьютер *) | | 1 |
| Дискеты с программным обеспечением | | 1 компл. |
| Руководство по эксплуатации | ГКНЖ. 50.00.000 РЭ | 1 |
| Формуляр | ГКНЖ 50.00.000 ФО | 1 |
*) Поставляется по требованию Заказчика.
Поверка
Поверка прибора осуществляется в соответствии с разделом 5 Руководства по эксплуатации ГКНЖ.50.00.000 РЭ «Фотометр-флуориметр микропланшетный ФФМ-01. Методика поверки», согласованным с ФГУП ВНИИОФИ в феврале 2010 г.
Основные средства поверки:
В режиме флуоресценции:
- аттестованные смеси флуоресцеина натрия с молярными концентрациями 100 пмоль/100 мкл, 50 пмоль/100 мкл, 10 пмоль/100 мкл, 5 пмоль/100 мкл,
1 пмоль/100 мкл, 0,5 пмоль/100 мкл, 0,1 пмоль/100 мкл, 0,05 пмоль/100 мкл, 0,025 пмоль/100 мкл, 0,01 пмоль/100 мкл, аттестуемые по процедуре приготовления согласно РМГ 60-2003.
В режиме абсорбции: комплект светофильтров поверочный КСП-01 (погрешность ±0,006 Б в диапазоне от 0 до 0,4 Б, ±1,5% в диапазоне от 0,401 Б до 2,5 Б).
Межповерочный интервал - 1 год.
Нормативные документы
1. ГОСТ 8.557-2007 Государственная система обеспечения единства измерений. Государственная поверочная схема для средств измерений спектральных, интегральных и редуцированных коэффициентов направленного пропускания и оптической плотности в
Лист № 5
Всего листов 5 диапазоне длин волн от 0,2 до 50,0 мкм, диффузного и зеркального отражений в диапазоне длин волн от 0,2 до 20,0 мкм.
2. ТУ 9441 - 050 - 29903757 - 2004 «Фотометр-флуориметр микропланшетный ФФМ-01. Технические условия».
Заключение
Тип фотометров-флуориметров микропланшетных ФФМ-01 утверждён с техническими и метрологическими характеристиками, приведёнными в настоящем описании типа и метрологически обеспечен при выпуске из производства и в эксплуатации согласно поверочной схеме ГОСТ 8.557-2007.
