Назначение
Приборы для проведения полимеразной цепной реакции Rotor-Gene 6000 моделей 6200-100, 62Н0-100, 6500-100, 65Н0-100, 6600-100 (далее по тексту - приборы) предназначены для мультиканального измерения концентрации конечного продукта полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени.
Приборы применяются в клинико-диагностических лабораториях медицинских учреждений и в научно-исследовательских институтах различного профиля.
Описание
Принцип действия приборов основан на измерении флуоресцентного сигнала, испускаемого в ходе полимеразной цепной реакции под воздействием излучения возбуждения, в каждом цикле температурно-кинетической амплификации генетического материала, с использованием в ПЦР смеси специфических олигонуклеотидов-затравок, нуклеотидтрифосфатов и фермента полимеразы. Интенсивность флуоресцентного сигнала пропорциональна концентрации продукта ПЦР. Измерение концентрации продуктов ПЦР в режиме реального времени осуществляется введением в реакцию флуоресцирующих красителей, сообщающих об увеличении количества дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) искомого типа, пропорционального увеличению флуоресцентного сигнала.
Интенсивность флуоресцентного излучения, испускаемого образцом, измеряется фотометрической системой регистрации прибора и индицируется на экране монитора внешнего компьютера в относительных единицах. При этом результаты измерений линейны в диапазоне концентрации красителя (флуоресцеина) от 0,3 до 3,0 мг/дм3.
Конструктивно прибор выполнен в едином корпусе, включающем роторный реакционный модуль с исследуемыми образцами, систему термоциклирования, выполненную в виде никельхромового нагревателя и вентилятора, и оптическую систему детектирования. В приборе может быть, в зависимости от модели, до 6 каналов детектирования, выполненных из светодиодов с высокой энергией излучения для возбуждения флуоресценции и фотоэлектронного умножителя с набором светофильтров.
Прибор для проведения полимеразной цепной реакции Rotor-Gene 6000 выпускается в следующих модификациях:
| Модель | 6200-100 | 62H0-100 | 6500-100 | 65H0-100 | 6600-100 |
| Длины волн | 470±10 | 460±15 | 470±10 | 460±15 | 365±20 |
| источника | 530±5 | 470±10 | 530±5 | 470±10 | 470±10 |
| излучения (возбуждения флуоресценции), нм | | 530±5 | 585±5 625±10 680±5 | 585±5 530±5 625±10 680±5 | 53O±15 585±5 625±10 680±5 |
| Число каналов | 2 | 2+канал HRM | 5 | 5+канал HRM | 6 |
| Длины волн | 510(±5) | 510(±5) | 510(±5) | 510(±5) | 460(±15) |
| светофильтров каналов поглощения, нм | 555(±5) | 555(±5) | 555(±5) 610(±5) 660(±10) >710 | 555(±5) 610(±5) 660(±10) >710 | 510(±5) 555(±5) 610(±5) 660(±10) >710 |
| Детектируемые | FAM, | FAM, | FAM, | FAM, SYBRGreen, | FAM, SYBRGreen, |
| красители | SYBRGreen, | SYBRGreen, | SYBRGreen, | GelStar, | GelStar, |
| GelStar, | GelStar, | GelStar, | Fluorescein, | Fluorescein, |
| Fluorescein, | Fluorescein, | Fluorescein, | EvaGreen, | EvaGreen, |
| EvaGreen, | EvaGreen, | EvaGreen, | PicoGreen, | PicoGreen, |
| PicoGreen, | PicoGreen, | PicoGreen, | LCGreen, Alexa | LCGreen, |
| LCGreen, | LCGreen, | LCGreen, | Fluor 488, Pico | Alexa Fluor 488, |
| Alexa Fluor | Alexa Fluor | Alexa Fluor | Green. JOE, VIC, | Pico Green, JOE, |
| 488, Pico | 488, Pico | 488, Pico | HEX, TET, | VIC, HEX, TET, |
| Green, JOE, | Green, JOE, | Green, JOE, | CAL Fluor Orange | CAL Fluor Orange |
| VIC, HEX, | VIC, HEX, | VIC, HEX, | 560, | 560, |
| TET, | TET, | TET, | Yakima Yellow, | Yakima Yellow, |
| CAL Fluor | CAL Fluor | CAL Fluor | Alexa Fluor 532, | Alexa Fluor 532, |
| Orange 560, | Orange 560, | Orange 560, | ROX, Cy3.5, | ROX, Cy3.5, |
| Yakima | Yakima | Yakima | Redmond Red, | Redmond Red, |
| Yellow, Alexa | Yellow, | Yellow, Alexa | Alexa Fluor 568, | Alexa Fluor 568, |
| Fluor 532 | Alexa Fluor 532 | Fluor 532, ROX, Cy3.5, Redmond Red, Alexa Fluor 568, Cy3, TAM RA, Cy5, Quasar 670, LC Red 640, Texas Red, CAL Fluor Red 590, Quasar 705, LC Red 705, Alexa Fluor 680, Cy5.5 | Cy3, TAMRA, Cy5, Quasar 670, LC Red 640, Texas Red, CAL Fluor Red 590, Quasar 705, LC Red 705, Alexa Fluor 680, Cy5.5 | Cy3, TAMRA, Cy5, Quasar 670, LC Red 640, Texas Red, CAL Fluor Red 590, Quasar 705, LC Red 705, Alexa Fluor 680, Cy5.5, Biosearch Blue, Marina Blue, Bothell Blue, Alexa Fluor 350 |
Для устойчивой работы управление прибором осуществляется с внешнего IBM-совместимого компьютера с процессором Pentium IV с тактовой частотой не ниже 2,0 ГГц, оснащенного специальным программным обеспечением.
Технические характеристики
Диапазон измерений флуоресценции, усл.ед.
Пределы отклонения от линейности (при измерении концентрации флуоресцеина в диапазоне концентраций от 0,3 до 3,0 мг/дм3), % Предел допускаемого среднего квадратического отклонения результата измерения,%
Объем проб для анализа, мкл
Емкость ротора реакционного модуля, пробирок
Скорость вращения ротора, об/мин
Диапазон рабочих температур термостатирования, °C,
Скорость изменения температуры потока воздуха, °С/сек
Напряжение питающей сети, В
Частота питающей сети, Гц
Потребляемая мощность, ВА, не более
Габаритные размеры (ВхШхГ), мм, не более
Масса, кг, не более
Рабочий диапазон температуры окружающей среды, °C
Рабочий диапазон относительной влажности окружающего воздуха (при 25 °C), % Рабочий диапазон атмосферного давления, кПа
от 1 до 100
±20
5
от 5 до 100 36, 72 или 100 300 - 400 от 25 до 99°С 10,0 220 ± 22 50 560 275 x 370x420 14 от 18 до 30 от 20 до 80 от 84 до 106
Знак утверждения типа
Знак утверждения типа наносится типографским способом на титульный лист Руководства по эксплуатации прибора для проведения полимеразной цепной реакции Rotor-Gene 6000 моделей 6200-100, 62Н0-100, 6500-100, 65Н0-100, 6600-100.
Комплектность
Приборы для проведения полимеразной цепной реакции Rotor-Gene 6000 моделей 6200-100, 62Н0-100, 6500-100, 65Н0-100, 6600-100 имеют следующую комплектность:
Прибор для проведения полимеразной цепной реакции Rotor-Gene 6000
Кабель RS-232
Кабель питания
36-ти и 72-х луночные роторы с фиксирующими кольцами
72-х и 96-ти луночные штативы
Инсталляционный диск с программным обеспечением
Руководство по эксплуатации с методикой поверки (раздел 15)
Расходные материалы - ПЦР пробирки (по производственной необходимости
Поверка
Приборы для проведения полимеразной цепной реакции Rotor-Gene 6000 моделей 6200-100, 62Н0-100, 6500-100, 65Н0-100, 6600-100 подлежат первичной и периодической поверке в соответствии с методикой поверки раздел 15 Руководства по эксплуатации, утвержденной ГЦИ СИ ФГУ «Ростест-Москва» в феврале 2009 г.
Межповерочный интервал - 1 год.
Средства поверки:
- аттестованные смеси-растворы флуоресцеина с концентрацией 0,3; 0,75; 1,5; 2,25; 3,0 мг/дм3, приготовленные в соответствии с требованиями РМГ 60-2003 «ГСП. Смеси аттестованные. Общие требования к разработке», погрешность приготовления не более ±5,0%. Процедура приготовления аттестованных смесей-растворов включена в методику поверки.
- флуоресцеин ТУ 6-09-2464-82 ч;
- весы электронные АТ201, номер по Государственному реестру 18949-99;
- дозаторы одноканальные переменного объема Pipetman Р исп. Р100 (20 - 100 мкл) и исп. Р1000 (200 1000 мкл) номер по Государственному реестру 28123-04.
Нормативные документы
Техническая документация фирмы "Corbett Research Pty Ltd.", Австралия.
ГОСТ Р 50444-92. «Приборы, аппараты и оборудование медицинские. Общие технические условия».
РМГ 60-2003 «ГСИ. Смеси аттестованные. Общие требования к разработке».
МИ 2639-2001. ГСИ. «Государственная поверочная схема для средств измерений массовой доли компонентов в веществах и материалах».
Заключение
Тип приборов для проведения полимеразной цепной реакции Rotor-Gene 6000 моделей 6200-100, 62Н0-100, 6500-100, 65Н0-100, 6600-100 утвержден с техническими и метрологическими характеристиками, приведенными в настоящем описании типа, метрологически обеспечен при выпуске из производства и в эксплуатации согласно государственной поверочной схеме МИ 2639-2001.
Выдано Регистрационное удостоверение Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития РФ № ФС 2006/1222 от 07.08.2006 г.
